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定量蛋白組分析
(Quantitative Proteomics)
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技術(shù)待認(rèn)領(lǐng)

技術(shù)概述

細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)組豐度的動態(tài)變化對各種生命過程有重要影響。例如在許多疾病的發(fā)生和發(fā)展進(jìn)程中,常常伴隨著某些蛋白質(zhì)的表達(dá)異常。 定量蛋白質(zhì)組學(xué)就是把一個基因組表達(dá)的全部蛋白質(zhì)或一個復(fù)雜的混合體系中所有的蛋白質(zhì)進(jìn)行精確的定量和鑒定。目前定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)主要分為標(biāo)記(Label)和非標(biāo)記的(Label Free)定量策略,其中標(biāo)記策略又分為體內(nèi)標(biāo)記(如 SILAC、15^N 標(biāo)記),以及體外標(biāo)記(如 iTRAQ、TMT 標(biāo)記)。

(資料來源:百泰派克)

技術(shù)詳情

MRM(Multiple Reaction Monitoring)是一種研究目標(biāo)蛋白分子的靶向定量蛋白組學(xué)研究方法。MRM基于目標(biāo)分子的信息,有針對性的選擇數(shù)據(jù)進(jìn)行質(zhì)譜數(shù)據(jù)采集,對于符合目標(biāo)離子規(guī)則的信號進(jìn)行采集,去除不符合規(guī)則的離子信號的干擾。MRM質(zhì)譜分析經(jīng)過三個階段:
1、通過MS篩選出與目標(biāo)分子特異性一致的母離子;
2、碰撞碎裂這些母離子,去除其他離子的干擾;
3、只對選定的特異MS/MS2離子進(jìn)行質(zhì)譜信號的采集。MRM質(zhì)譜技術(shù)是高精準(zhǔn)度的蛋白定量鑒定技術(shù),是一次性精準(zhǔn)定量研究復(fù)雜樣品中多個目標(biāo)蛋白的絕佳方法。如果借助同位素標(biāo)記的目標(biāo)肽段作為內(nèi)參,可以實現(xiàn)蛋白絕對定量鑒定。

(資料來源:百泰派克)

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