探針是一小段單鏈DNA或者RNA片段(大約是20到500bp),用于檢測(cè)與其互補(bǔ)的核酸序列,稱(chēng)為DNA探針,RNA探針。
DNA探針根據(jù)其來(lái)源有3種:一種來(lái)自基因組中有關(guān)的基因本身,稱(chēng)為基因組探針(genomic probe);另一種是從相應(yīng)的基因轉(zhuǎn)錄獲得了mRNA,再通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄得到的探針,稱(chēng)為cDNA探針(cDNA probe)。與基因組探針不同的是,cDNA探針不含有內(nèi)含子序列;第三種,在體外人工合成堿基數(shù)不多的與基因序列互補(bǔ)的DNA片段,稱(chēng)為寡核苷酸探針。
RNA探針,根據(jù)在RNA雜交中所使用的探針依其來(lái)源可分為三種:即特異性cDNA、cRNA探針和人工合成寡核苷酸探針。cRNA探針,是以cDNA為模板,通過(guò)體外轉(zhuǎn)錄而獲得的。cRNA與RNA之間形成的雜交體要比cDNA-RNA雜交體穩(wěn)定。
為了確定探針是否與相應(yīng)的核苷酸雜交,有必要對(duì)探針加以標(biāo)記,以便在結(jié)合部位獲得可識(shí)別的信號(hào)。探針的標(biāo)記方式有放射性標(biāo)記和非放射性標(biāo)記。標(biāo)記物質(zhì)有放射性元素(如32P等)和非放射性物質(zhì)(如生物素、地高辛等)。
(資料來(lái)源:百度百科)