細(xì)胞凋亡(Cell Apoptosis)是指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,由基因控制的細(xì)胞自主的有序的死亡。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死不同,細(xì)胞凋亡不是一件被動的過程,而是主動過程,它涉及一系列基因的激活、表達(dá)以及調(diào)控等的作用。
細(xì)胞凋亡檢測最常用的方法為AnnexinV/PI雙染法流式檢測,其原理為:磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine,PS)正常位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè),但在細(xì)胞凋亡的早期,PS可從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面,AnnexinV是一種分子量為35-36KD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,能與PS高親和力特異性結(jié)合。將AnnexinV進(jìn)行熒光素FITC(異硫氰酸熒光素)標(biāo)記,以標(biāo)記了的Annexin-V作為熒光探針,利用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡可檢測細(xì)胞凋亡的發(fā)生。
碘化丙啶(propidine iodide,PI)是一種核酸染料,它不能透過完整的細(xì)胞膜,無法進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi)部,但在凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞,PI 能夠透過細(xì)胞膜而使細(xì)胞核紅染。因此將Annexin V 與PI 匹配使用,就可以將凋亡早晚期的細(xì)胞以及死細(xì)胞區(qū)分開來。

(資料來源:百度百科、愛普拜生物)